Полимеразна верижна реакция (PCR) и STD тестване

Posted on
Автор: Virginia Floyd
Дата На Създаване: 7 Август 2021
Дата На Актуализиране: 3 Може 2024
Anonim
ПЦР(полимеразная цепная реакция)
Видео: ПЦР(полимеразная цепная реакция)

Съдържание

Анализът на полимеразна верижна реакция (PCR) е лабораторна техника. Целта на PCR тестването е да се намерят малки количества ДНК в проба, като се използва процес, известен като усилване. По време на PCR амплификация, интересуващата се ДНК се копира многократно, докато я има достатъчно за анализ и откриване. Например, PCR може да се използва за идентифициране на малки количества ДНК от организмите, които причиняват гонорея или хламидия, които присъстват в проба от урина.

Как работи PCR?

Първата стъпка на PCR е да се създаде грундове. Това са кратки последователности на ДНК, които съвпадат до краищата на ДНК пробата, която се опитвате да откриете. Те са трикът за намиране, усилване и откриване на определено парче ДНК. Това парче ДНК може да се използва за идентифициране на патоген. Може да се използва и за извършване на неща като откриване на гени за антибиотична резистентност.

След като имате праймерите, следващата стъпка в PCR е нагряването на пробата, така че двуверижната ДНК да се отдели на две единични вериги - това се нарича денатурация. След това грундоветесе комбинират с пробата ДНК. След това ДНК полимераза се използва за започване на репликация на ДНК на мястото на праймера. Накрая, ДНК се загрява, за да се отделят нишките още веднъж. С това целият процес на PCR започва отново.


Количеството на ДНК сегмента, който представлява интерес в пробата, се увеличава експоненциално с всеки PCR цикъл. В първия цикъл едно копие става две. След това две копия стават четири, след това стават осем и т.н. Този експоненциален растеж означава, че като цяло са необходими само 20 до 40 цикъла, за да се определи дали въпросната ДНК е налице. (Ако ДНК е налице, 20-40 цикъла също са достатъчни, за да се осигури достатъчна проба за анализ).

Всички етапи на полимеразна верижна реакция - денатуриране на ДНК, прилагане на праймерите и удължаване на ДНК - се случват при различни температури. Това означава, че след като първоначалната смес е съставена, стъпките могат да бъдат контролирани чрез процес, известен като термоциклиране. Термоциклирането означава, че температурата се задържа на необходимите нива само достатъчно дълго, за да се осъществи всяка стъпка. По този начин, PCR е ефективен начин за амплифициране на количеството целева ДНК. Всъщност това може да се извърши в една епруветка с малка нужда от човешка намеса.


Полимеразната верижна реакция представлява революция в биологичната техника, когато е разработена за първи път в началото на 80-те години. Създателят на PCR, Kary Mullis, спечели Нобелова награда за химия за своята работа през 1993 г.

Защо PCR е от значение за тестване на полово предавани болести

Полимеразна верижна реакция и свързани техники като лигазна верижна реакция, се оказват от нарастващо значение за тестване на STD. Това е така, защото тези техники могат директно да идентифицират малки количества вирусна ДНК или РНК в проби. Идентифицирането на генетичния код на патогена не изисква патогенът да е жив, за разлика от бактериалната култура или вирусната култура. Също така не се изисква инфекцията да се е случила преди достатъчно дълго време, за да могат хората да са развили откриваема реакция на антитела (начинът, по който инфекциите се откриват чрез ELISA.) Това означава, че PCR техниките понякога могат да откриват заболявания по-рано от други тестове. Още по-добре, STD могат да бъдат открити, без да е толкова необходимо да се притеснявате за поддържане на пробите живи или тестване точно в точното време.


Най-добрите домашни STD тестове